过氧化氢酶是一种常见的酶,广泛应用于医药、食品加工、环境保护及其他实验室领域。测量过氧化氢酶活性是衡量其催化能力的一种方法。
测定过氧化氢酶活性需要以下试剂和设备:
- 避光离心管
- 过氧化氢底物
- 磷酸缓冲液(pH 7.0)
- 过氧化物酶(enzyme)
- 1%苯酚红(phenol red)
- 分光光度计
步骤:
- 将离心管分为两组,一组作为对照组,使其内含2 mL 磷酸缓冲液和2mL苯酚红,另一组的2 mL底物溶液中加入过氧化氢酶。
- 将两组离心管放在37℃下孵育15分钟。
- 将两组离心管分别取出,并分别加入1 mL的5%三氯醋酸。
- 将离心管离心5分钟,然后量取上清。
- 用分光光度计测量上清的吸光度值,对照组为A1,实验组为A2。
- 计算过氧化氢酶的活性:
以上就是测定过氧化氢酶活性的方法,特别注意离心时不能离心太猛,防止原料飞溅,测定结果无效。